生物测定（bioassay），利用某些生物对某些物质(如维生素、氨基酸)的特殊需要，或对某些物质(如激素、植物激素、抗生素、药物等)的特殊反应来定性、定量测定这些物质的方法。又称生物检（鉴）定。如用小鼠的惊厥反应测定胰岛素，用微生物测定维生素B₁₂等。生物测定有时比其他测定方法更为灵敏和专一。它是生物学、医学、特别是毒理学的重要内容和基础。基本内容包括毒性测定和三致实验。

毒性测定生物测定中最重要的一个部分。经典的毒性测定根据染毒时间长短分为：①急性毒性试验，一次给予受试物后动物所产生的毒性反应，观察时间一般为一周。②蓄积性毒性试验，给予多次小剂量的受试物，观察蓄积和解毒的关系，需几天、几周或几月。③亚急性毒性试验，多次给以受试物时所引起的毒性作用，其试验期通常为动物生命期的1／30～1／10。④慢性毒性试验，观察实验动物长期染毒所产生的反应，观察时间为动物整个生命期的大部分或终生，有时还包括若干代。

三致实验即致癌、致畸型、致突变实验。致癌试验测定某因素是否引起正常细胞转化为癌细胞。致畸型试验，观察一代甚至几代，看有害因素是否造成胎儿的畸型或死亡。致突变试验指遗传物质的损伤和改变，包括：DNA构型的改变，DNA中碱基的取代或位置的改变，染色体的缺失、断裂、易位、互换，染色体数目的改变，修复功能的损伤等。